(1)无菌工厂无菌室的清洁度应达到10,000,室内温度应保持在20-24摄氏度,湿度应保持在45%-60%,并且超净的清洁度手术台应达到100台。应当每月在无菌室内检查菌落的数量。打开无菌室或无尘工作台时,应取几个直径为90 mm的无菌盘。在无菌处理中,应分别注入15 ml平板计数琼脂培养基,融化并冷却至约45摄氏度。固化后,将琼脂培养基置于36°C的培养箱中48小时。证明该培养皿是无菌的。取3-5个板并将其放在工作位置的左,中和右部分。暴露30分钟后,将培养皿置于36 1 C培养箱中48小时,然后取出进行检查。 100级洁净区板上的平均细菌数不得超过一个菌落,而10000级洁净室板上的平均细菌数则不得超过三个菌落。如果超出限制,则应对无菌室进行彻底消毒,直到重复检查达到要求为止。
(2)无菌室应保持整洁。在室内只能存放必要的测试设备,例如酒精灯,酒精棉,打火机,镊子,接种环,剪刀,玻璃笔等。严禁堆放杂物以防止污染。
(3)食品无菌工厂的无菌室应配备工作浓度的消毒剂,例如5%的甲酚溶液,75%的酒精,0.1%的溴天竺葵溶液等。
(4)所有需要带入无菌室的仪器,药品,玻璃器皿等均应用适当的方法包装或消毒。例如,将培养皿和移液管在干燥室中的不锈钢桶中在160-170摄氏度下灭菌1小时至2小时,并将盐水在高压釜中在121摄氏度灭菌20分钟。
(5)在无菌室中使用之前,必须将无菌室和缓冲室中的紫外线打开30分钟以上,并同时打开通风风扇。紫外线灯关闭半小时后,您可以进入无菌室工作。检查样品后,应及时清理剩余的样品以及各种药品和玻璃器皿。安全撤离后,应打开所有紫外线灯30分钟以进行消毒。
(6)被检查的样品在检查前应保持完整,并且不得打开以防止污染。检查前,必要时用75%的酒精棉球消毒外表面,并用点燃的酒精棉球消毒。
(7)每次操作均应进行空白控制,以检查无菌操作的可靠性。
(8)吸收细菌液时,必须由吸耳吸收。不要用嘴直接接触吸管。如果吸管接触到手和其他无菌物品,则必须更换吸管以防止污染。
(9)每次使用接种针之前和之后,都必须通过火焰燃烧对其进行消毒。冷却后,可以接种培养物。
(10)将装有细菌溶液的移液器和试管浸入装有5%溶血素溶液的无菌桶中,并冲洗24小时。培养皿应在可以处理营养成分之前在高压灭菌器中重新灭菌。切记不要直接冲入下水道以防堵塞。如果将细菌溶液洒在桌子上或地面上,应立即在污染区域将其用5%碳酸溶液或3%裂解剂倒置至少30分钟,然后进行处理。当工作服和工作帽被细菌溶液污染时,应立即将其取下并用高压蒸汽消毒。
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